使用倒置显微镜时,由于其光学元件位于样品下方,因此您可以从下面查看样品;使用正置显微镜时,您可以从上方查看样品。传统上,倒置显微镜用于生命科学研究,因为重力使样品在水溶液中沉入样品架的底部,而从上方看不到太多。但是一段时间以来,倒置显微镜在工业应用中也变得越来越流行。我们看了倒置显微镜在工业应用中具有哪些优势。
1)倒置显微镜比正置显微镜给您更大的自由度
对于正置显微镜,样品的大小被限制为平均高度为80mm,重量为3kg,这也取决于所使用的物镜。此限制不适用于倒置显微镜。由于光学元件位于镜台下方,因此样品被置于物镜上方。这意味着用户的工作距离更大,可以处理重达30kg的巨大沉重样品。因此,如果您处理的样品很大,很重,或者样品的大小和重量差异很大,倒置显微镜将为您提供所需的自由度。
倒置显微镜的光路装有大样品的倒置显微镜
图1:装有大样品的倒置显微镜。
2)倒置显微镜使您可以在较短的时间内查看更多样品
使用倒置显微镜,您只需将样品放在平台上,一次聚焦在表面上并对其成像。完了样品在所有放大倍数下都保持聚焦,并且相同种类的其他样品也都聚焦。
使用正置显微镜,工作流程涵盖了操作员需要执行的更多任务:您需要放下样品台,将其移出,取出样品架并取出一个新的样品架,将样品放在样品架上并加以保护,然后使用样品压机在更改为较低的放大倍数之前,先将样品表面调平。操作员需要练习所有这些步骤,但是每次执行时,所有不同的步骤仍会承担失败的风险。
对于未经培训的操作员来说,样品的放置可能是艰巨的任务–使用倒置显微镜,将样品放置在载物台上成为孩子们的游戏,并且所需的步骤也更少。
另一个要点是:为直正置显微镜描述的所有步骤都需要花费时间,特别是如果您必须一个接一个地查看许多样本时,这些步骤会加起来。让我们假设有经验的用户操作正置显微镜。即使每步仅需要五秒钟,倒置显微镜的用户也会击败他的同事:以下是使用正置显微镜工作的用户与使用倒置显微镜(例如工业用LeicaDMi8)工作的用户的示例应用程序。他们的任务是分析标准金相样品。
行动正置总倒置总
降低载物台5秒5–
移出载物台5秒10–
取下样品架/换一个新的5秒15–
将样品架放在支架上并对其进行保护5秒20–
使用压样机来平整样品表面5秒25–
更改为较低的放大倍数以进行定位5秒305秒5
将样品放回载物台上,向后移动,重新聚焦10秒40510
标签1:正置和倒置显微镜的工作流程。
根据此假设,与在正置显微镜上进行分析相比,倒置显微镜可使样品之间的变化快四倍,因此使用倒置显微镜可以实现更高的通量。
3)使用倒置显微镜,您无法将物镜撞击到样品中
将您的物镜撞到样本中对我们所有人来说都是偶然的。使用正置显微镜是众所周知的风险。发生这种情况时,您不仅需要投资于新的物镜,而且还必须丢弃样本。在大多数情况下,没有备用物镜可立即获得,但需要订购。如果没有第二台显微镜,这会导致样品通量降低,并且在最坏的情况下会完全中断工作。
倒置显微镜的设计有助于大大降低物镜撞击样品的风险。首先,将物镜放置在载物台下方,从而更加受保护。其次,诸如LeicaDMi8等用于工业应用的仪器具有上聚焦停止功能,该功能通过定义物镜架的上限来提供额外的安全性。因此,在保护您的投资的同时,您可以专注于自己的任务,而不必花费时间担心工具和样品可能损坏。
4)倒置显微镜可节省样品制备的时间和金钱
样品制备受到限制,因为样品可以原样采集并放在载物台上。另外,仅需处理样品的一侧。您节省了时间,因为您不需要嵌入样品,也不需要切出较大样品的一部分。在显微镜上处理样品时,无需使用样品压力机来调平样品。您无需执行七个样品准备步骤,而只需执行两个。这样可以节省您的时间和金钱。
左:用于倒置显微镜的具有抛光表面的样品。右:对于正置显微镜,必须将样品安装在样品架上
图2:左:用于倒置显微镜的具有抛光表面的样品。右:对于正置显微镜,必须将样品安装在样品架上。
5)倒置显微镜的工作方向与世界相同
如果您用正置显微镜观察样品,大脑会裂开:当您将载物台向左移动时,由于仪器的结构,您通过目镜看到的样品图像将向右移动。反之亦然,当然。
如果您使用倒置显微镜(例如工业应用的LeicaDMi8)观察样品,则样品的图像将沿着与载物台相同的方向移动。它表现了我们学到的事物在世界上移动的方式。特别是对于未经培训的用户,这是他们工作的真正缓解,因为他们不必考虑样品移动的方向,而就好像没有光学器件可以看透一样。而且,您在执行操作时无需考虑的所有内容都可以节省时间,从而加快流程。