通过本教程,探索尼康显微镜常见物镜的大概景深。用户可以通过下拉菜单从当前的CFI60无限远校正物镜系列中选择像差校正功能。
通过本互动教程,探索尼康常见物镜的大概景深。用户可以通过下拉菜单从当前的CFI60无限远校正物镜系列中选择像差校正功能。
要操作本教程,请首先从“选择物镜”下拉菜单中选择适当的物镜。该清单涵盖了尼康在消色差,平场消色差,萤石平场和复消色差系列中当前的所有物镜。还包括几个专门的物镜。接下来,使用“选择e”滑块来改变最小距离(介于4到24微米之间),该距离可由放置在显微镜物镜图像平面中的检测器分辨。
在显微镜的高数值孔径下,景深主要由波动光学器件决定,而在较低数值孔径下,几何光学混乱的圆占主导地位。使用多种不同的标准来确定图像何时变得不可接受的清晰,几位作者提出了不同的公式来描述显微镜中的景深。总景深由波和几何光学景深之和得出:
dtot=λ⋅nNA2+nM⋅NAe
其中d(tot)代表景深,λ是照明光的波长,n是盖玻片和物镜前透镜之间的介质(通常是空气(1.000)或浸油(1.515))的折射率,和NA等于物镜的数值孔径。可变e是可以由被放置在显微镜物镜,其横向放大率是的图像平面中的检测器来解决的最小距离中号。使用该方程式,景深(d(tot))和波长(λ)必须以相似的单位表示。例如,如果要以微米为单位计算d(tot),l也必须以微米为单位(方程式中以700微米输入700纳米红光)。请注意,衍射极限景深(方程式中的第一项)与数值孔径的平方成反比,而分辨率的横向极限则以与数值孔径的一阶成反比的方式减小。因此,系统数值孔径对可获得的光学部分的轴向分辨率和厚度的影响远大于显微镜的横向分辨率。